ප්රශස්ත සාන්ද්රණය තීරණය කරන්නේ කෙසේද?
inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) සඳහා, සාන්ද්රණය වැඩි වන තරමට වඩා හොඳය.ප්රශස්ත සාන්ද්රණය විශේෂිත පර්යේෂණාත්මක තත්වයන් සහ අපේක්ෂිත ප්‍රේරක බලපෑම මත රඳා පවතී.
සාමාන්යයෙන්, IPTG සාන්ද්රණය 0.1-1 mM පරාසයක භාවිතා වේ.අඩු සාන්ද්රණය මගින් සෛල වර්ධනයට අහිතකර බලපෑම් අවම කර ගත හැකි අතර ඉලක්කගත ප්‍රෝටීනවල අධික ලෙස ප්‍රකාශ කිරීම හේතුවෙන් සයිටොටොක්සිසිටි බව අඩු කළ හැක.ඉහළ සාන්ද්‍රණයන් අධික සෛල පරිවෘත්තීය බරක් ඇති කළ හැකි අතර, සෛල වර්ධනයට සහ ප්‍රකාශන කාර්යක්ෂමතාවයට බලපායි.
ප්රශස්ත සාන්ද්රණය තීරණය කිරීමේ ක්‍රමය වනුයේ විවිධ සාන්ද්‍රණයන්හි IPTG ප්‍රේරක පරීක්ෂණ පැවැත්වීමෙන් ඉලක්කගත ප්‍රෝටීනයේ ප්‍රකාශන මට්ටම ඇගයීමයි.කුඩා පරිමාණයේ සංස්කෘතික පරීක්ෂණ IPTG සාන්ද්‍රණ පරාසයක් භාවිතයෙන් සිදු කළ හැක (උදා. 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ආදිය) සහ ඉලක්කගත ප්‍රෝටීනයේ ප්‍රකාශන මට්ටම හඳුනා ගැනීමෙන් විවිධ සාන්ද්‍රණයන්හි ප්‍රකාශන බලපෑම ඇගයීමට ලක් කළ හැක (උදා. බටහිර පැල්ලම් හෝ ප්රතිදීප්ත හඳුනාගැනීම).පර්යේෂණාත්මක ප්‍රතිඵලවලට අනුව, හොඳම ප්‍රකාශන ආචරණය සහිත සාන්ද්රණය ප්රශස්ත සාන්ද්රණය ලෙස තෝරා ගන්නා ලදී.
ඊට අමතරව, ඔබට සමාන පර්යේෂණාත්මක තත්වයන් යටතේ බහුලව භාවිතා වන IPTG සාන්ද්‍රණ පරාසය අවබෝධ කර ගැනීමට අදාළ සාහිත්‍යය හෝ වෙනත් රසායනාගාරවල අත්දැකීම් වෙත යොමු විය හැකිය, පසුව පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව ප්රශස්ත කර සකස් කළ හැකිය.
ප්රශස්ත සාන්ද්රණය විවිධ ප්‍රකාශන පද්ධති, ඉලක්ක ප්‍රෝටීන සහ පර්යේෂණාත්මක තත්ත්වයන් මත පදනම්ව වෙනස් විය හැකි බව සැලකිල්ලට ගැනීම වැදගත්ය, එබැවින් එක් එක් සිද්ධිය අනුව ප්රශස්ත කිරීම වඩාත් සුදුසුය.
පසු කාලය: සැප්-28-2023